Reactivo TRAzol

El reactivo TRAzol es un reactivo listo para usar para el aislamiento de ARN total de células y tejidos. Este reactivo, una solución monofásica de fenol e isotiocianato de guanidina, supone una mejora respecto al método de aislamiento de ARN en un solo paso. Durante la homogeneización o lisis de la muestra, el reactivo TRAzol mantiene la integridad del ARN, a la vez que desintegra las células y disuelve sus componentes. La adición de cloroformo, seguida de centrifugación, separa la solución en una fase acuosa y una fase orgánica. El ARN permanece exclusivamente en la fase acuosa. Tras la transferencia de la fase acuosa, el ARN se recupera mediante precipitación con alcohol isopropílico. Tras la eliminación de la fase acuosa, el ADN y las proteínas de la muestra pueden recuperarse mediante precipitación secuencial. La precipitación con etanol produce ADN de la interfase, y una precipitación adicional con alcohol isopropílico produce proteínas de la fase orgánica.

La copurificación del ADN puede ser útil para normalizar la producción de ARN entre muestras. Esta técnica funciona bien con pequeñas cantidades de tejido (50-100 mg) y células (5 x 10^6), así como con grandes cantidades de tejido (>1 g) y células (>10^7) de origen humano, animal, vegetal o bacteriano. La simplicidad del método con el reactivo TRAzol permite el procesamiento simultáneo de un gran número de muestras. El procedimiento completo se puede completar en una hora. El ARN total aislado con el reactivo TRAzol está libre de contaminación por proteínas y ADN.

Solicitud
El ARN purificado está libre de impurezas e inhibidores de enzimas y tiene una A260/280=1,8-2,0, es adecuado para aplicaciones como:
PCR de transcripción inversa (RT-PCR)
PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR)
transferencia Northern
Ensayos de protección de nucleasas
Amplificación de ARN para análisis de microarrays
Preparación de la biblioteca de ADNc después de la selección de poli(A)+

Características
Rendimiento estable
Rendimiento confiable de ARN total purificado de alta calidad en aplicaciones posteriores