ARNasa H

Concentración: 5 U/ µ L

Descripción del Producto
La ribonucleasa H (RNasa H) puede degradar específicamente la cadena de ARN en híbridos ARN-ADN. Esta enzima no hidroliza los enlaces fosfodiéster en el ADN y el ARN monocatenarios o bicatenarios.

Fuente
Cepa de E. coli MRE-600.

Definición de unidad

Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la formación de 1 nmol de productos solubles en ácido en 20 minutos a 37 °C.

La actividad enzimática se determina en la siguiente mezcla: 20 mM Tris-HCl (pH 7,8), 40 mM KCl, 8 mM MgCl2 _, 1 mM DTT, 24 µM [ ^3H ]-poli(A)·poli(dT), 0,03 mg/mL BSA y 4 % (v/v) de glicerol.

Ámbito de aplicación
- Eliminación del ARNm antes de la síntesis del ADNc de segunda cadena
- RT-PCR y qRT-PCR: Eliminación de ARN después de la síntesis de ADNc de primera cadena
- Eliminación de la secuencia poli(A) del ARNm después de la hibridación con Oligo(dT)
- Escisión específica del sitio del ARN
- Estudio de productos de reacciones de poliadenilación in vitro